悬液定量杀灭试验

2025-03-24 微析研究院 塑料检测

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悬液定量杀灭试验是评估消毒剂、抗菌产品对悬浮微生物杀灭效果的标准化方法。通过将微生物悬液与待测样品混合，经特定时间作用后，中和残留成分并培养计数存活微生物，计算杀灭对数值或杀灭率。该试验可验证产品对细菌（如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌）、真菌（白色念珠菌）及病毒的灭活能力，广泛应用于医疗消毒、日化产品、环境消杀等领域，为产品注册、质量控制及效果验证提供科学依据。

悬液定量杀灭试验项目介绍

悬液定量杀灭试验通过模拟微生物在液体环境中的暴露场景，定量分析消毒剂或抗菌剂的即时杀灭效能。

试验采用标准菌株制备悬液，严格控制温度、pH值及接触时间，确保结果可比性和重复性。

适用于液态、粉状、膏体等多种形态产品的测试，涵盖杀菌率、抑菌率及灭活动力学研究。

悬液定量杀灭试验项目种类

细菌杀灭试验：包括革兰氏阳性菌、阴性菌及分枝杆菌（如结核杆菌）的定量灭活测试。

真菌杀灭试验：针对酵母菌、霉菌孢子（如黑曲霉）的杀灭效果评估。

病毒灭活试验：采用噬菌体或包膜病毒（如流感病毒）模拟病毒灭活过程。

时效性测试：设置5min、10min等多时间节点验证持续杀灭能力。

悬液定量杀灭试验所需样品

待测样品：消毒剂原液或使用浓度溶液，需提供pH值、有效成分含量等参数。

阳性对照：ATCC标准菌株悬液（浓度1×10⁶~10⁸ CFU/mL）。

中和剂：硫代硫酸钠、卵磷脂等，需通过中和剂鉴定试验验证有效性。

培养基：TSA、SDA等特定培养基，用于残留微生物复苏培养。

悬液定量杀灭试验方法步骤

1、菌悬液制备：将标准菌株活化后，用PBS缓冲液调整至目标浓度。

2、样品-菌液混合：按1:1或1:9体积比混合，精确控制作用温度（20±1℃）。

3、作用时间控制：使用计时器精确控制5s-60min的暴露时间。

4、中和反应：立即加入中和剂终止杀菌作用，涡旋混合10s。

5、梯度稀释：采用10倍系列稀释法降低样品浓度。

6、平板接种：取0.5mL稀释液倾注平板，每个梯度做3个平行样。

7、培养计数：细菌37℃培养48h，真菌28℃培养72h，统计存活菌落数。

8、结果计算：杀灭对数值=对照组平均菌落对数-试验组菌落对数。

悬液定量杀灭试验依据标准

GB/T 38502-2020 消毒剂实验室杀菌效果检验方法

ISO 20743:2021 抗菌整理纺织品抗菌性能测定

ASTM E1053-20 化学消毒剂病毒灭活效能标准试验方法

EPA OCSPP 810.2200 消毒剂产品性能测试指南

EN 1276:2019 化学消毒剂和防腐剂-定量悬浮试验

GB 15981-2021 消毒与灭菌效果的评价方法与标准

AOAC Official Method 960.09 杀菌剂定量悬浮试验

ISO 14937:2009 医疗产品灭菌-微生物学方法

USP <1072> 消毒剂效力测试章节

JIS Z 2801:2019 抗菌加工制品-抗菌性能试验方法

悬液定量杀灭试验服务周期

常规测试周期7-10个工作日，含菌种活化、三次重复实验及数据分析。

加急服务可缩短至5个工作日，需额外支付30%加急费用。

特殊菌种（如艰难梭菌孢子）测试周期延长至15个工作日。

病毒灭活试验因培养检测复杂，周期通常为10-12个工作日。

悬液定量杀灭试验应用场景

医疗器械消毒剂注册申报（国家卫健委消字号审批）

抗菌纺织品、塑料制品的ISO等级认证测试

食品加工设备清洗消毒剂的效果验证

医院感染控制中环境表面消毒剂选择

化妆品防腐剂体系的效能评估（USP51/61标准）

疫源地消毒服务机构的消毒效果评价